艾赛亚·华盛顿于1963年生于美国德克萨斯州休斯顿。在投身演艺事业前，他曾经参加过美国空军，他的梦想是成为第2个“华盛顿将军”。他曾经参演过著名黑人导演斯派克·李的《悬疑犯》、《搭公车》等作品。
艾赛亚·华盛顿最为人所知的作品是美剧《实习医生格蕾丝》，他在其中饰演普雷斯顿·伯克医生。艾赛亚·华盛顿因为此剧而受到广大观众的欢迎，2006年被《人物》娱乐杂志选为“50个最美的人”之一。2006年，经媒体曝光他在《实习医生格蕾丝》片场和主演帕特里克·德姆西发
生口角，在争执中他侮辱了在剧中饰演乔治·欧麦立医生的男演员T.R.奈特。这个丑闻对华盛顿影响极大，尽管他曾公开澄清自己没有辱骂T.R.奈特并且向帕特里克·德姆西公开道歉，ABC电视台还是在2007年的时候解雇了他。